干細(xì)胞是目前醫(yī)學(xué)界非常重要的研究領(lǐng)域,干細(xì)胞技術(shù)被廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)、基因治療以及細(xì)胞治療等方面。干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基是干細(xì)胞培養(yǎng)過程中使用的一種特殊培養(yǎng)基,相對(duì)于傳統(tǒng)含有血清成分的培養(yǎng)基,它不會(huì)帶來(lái)血清帶來(lái)的易感染,污染,批次差異等問題,大大地提高了干細(xì)胞培養(yǎng)的效率和穩(wěn)定性。那么接下來(lái)就讓我們了解一下
干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法。
使用步驟:
1、準(zhǔn)備:拉取需要使用的培養(yǎng)基,放置于潔凈的操作臺(tái)上,旋轉(zhuǎn)均勻。
2、取樣:將需細(xì)胞溶解后且雜質(zhì)過濾完畢的細(xì)胞懸浮液,加入到培養(yǎng)基中,按照比例加入適量的細(xì)胞因子,并從側(cè)面充分旋轉(zhuǎn)混合均勻。
3、孵育:將混合好的培養(yǎng)基,加入到預(yù)先處理過的培養(yǎng)皿中,貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng),放入孵箱中,保持恒溫濕度環(huán)境。
4、觀察:觀察各培養(yǎng)皿內(nèi)的細(xì)胞生長(zhǎng)情況,代換培養(yǎng)基時(shí)需要小心、輕柔地抽取并加入新的干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基。
使用注意事項(xiàng):
1、不要將未經(jīng)處理的培養(yǎng)基放在較高溫度下,其儲(chǔ)存的環(huán)境應(yīng)為2-8℃之間,且避免陽(yáng)光直射和暴露于外界空氣中。
2、混合培養(yǎng)基時(shí),須使用專門的勻漿裝置或渦流混合器,以避免不均勻性的出現(xiàn)。
3、必須防止雜質(zhì)污染整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)過程,并采用專門定制的頸口瓶、平底瓶等工具。
4、細(xì)胞溶解后的懸浮液在加入培養(yǎng)基前,必須先進(jìn)行微孔濾器過濾,以避免細(xì)胞碎片或雜質(zhì)進(jìn)入干細(xì)胞中,影響從初級(jí)培養(yǎng)中篩選出良好的細(xì)胞系的篩選效率。
總之,干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的使用對(duì)干細(xì)胞方面有著重要的意義,正確的使用方法和注意事項(xiàng)能夠?yàn)樯锛夹g(shù)的長(zhǎng)足進(jìn)展提供保障。